रीकॉम्बीनंट स्पाइक प्रोटीनवर आधारित पोर्सिन तीव्र डायरिया सिंड्रोम कोरोनाव्हायरस IgG अँटीबॉडी शोधण्यासाठी अप्रत्यक्ष एलिसा पद्धतीचा विकास

पोर्साइन एक्यूट डायरिया सिंड्रोम कोरोनाव्हायरस (SADS-CoV) हा एक नवीन शोधलेला पोर्साइन एंटरिक पॅथोजेनिक कोरोनाव्हायरस आहे ज्यामुळे नवजात पिलांमध्ये पाणचट डायरिया होऊ शकतो आणि डुक्कर उद्योगाचे महत्त्वपूर्ण आर्थिक नुकसान होऊ शकते.सध्या, SADS-CoV संसर्ग आणि लसीच्या परिणामकारकतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी कोणतीही योग्य सेरोलॉजिकल पद्धत नाही, त्यामुळे ही कमतरता भरून काढण्यासाठी प्रभावी एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट परख (ELISA) वापरण्याची तातडीची गरज आहे.येथे, मानवी IgG Fc डोमेनशी जोडलेले SADS-CoV स्पाइक (S) प्रथिने व्यक्त करणारे रीकॉम्बीनंट प्लाझमिड रीकॉम्बीनंट बॅक्युलोव्हायरस तयार करण्यासाठी तयार केले गेले आणि HEK 293F पेशींमध्ये व्यक्त केले गेले.S-Fc प्रथिन प्रोटीन G रेझिनने शुद्ध केले जाते आणि मानव-विरोधी Fc आणि SADS-CoV अँटीबॉडीजसह प्रतिक्रियाशीलता टिकवून ठेवते.नंतर S-Fc प्रोटीनचा वापर अप्रत्यक्ष ELISA (S-iELISA) विकसित करण्यासाठी आणि S-iELISA ची प्रतिक्रिया परिस्थिती अनुकूल करण्यासाठी केला गेला.परिणामी, इम्युनोफ्लोरेसेन्स परख (IFA) आणि वेस्टर्न ब्लॉटिंगद्वारे पुष्टी केलेल्या 40 SADS-CoV नकारात्मक सेरा च्या OD450nm मूल्याचे विश्लेषण करून, कट-ऑफ मूल्य 0.3711 असल्याचे निश्चित केले गेले.S-iELISA च्या धावांच्या आत आणि दरम्यान 6 SADS-CoV पॉझिटिव्ह सेरा चे भिन्नता गुणांक (CV) सर्व 10% पेक्षा कमी होते.क्रॉस-रिअॅक्टिव्हिटी चाचणीने असे दर्शवले की S-iELISA इतर पोर्सिन व्हायरस सेरासह क्रॉस-रिअॅक्टिव्हिटी नाही.याव्यतिरिक्त, 111 क्लिनिकल सीरम नमुन्यांच्या शोधावर आधारित, IFA आणि S-iELISA चा एकूण योगायोग दर 97.3% होता.सीरमच्या 7 वेगवेगळ्या OD450nm मूल्यांसह व्हायरस न्यूट्रलायझेशन चाचणीत असे दिसून आले की S-iELISA द्वारे आढळलेले OD450nm मूल्य व्हायरस न्यूट्रलायझेशन चाचणीशी सकारात्मकपणे संबंधित होते.शेवटी, S-iELISA 300 डुक्कर फार्म सीरम नमुन्यांवर केले गेले.इतर पोर्सिन एन्टरोव्हायरसच्या व्यावसायिक किट्सने असे दर्शवले की SADS-CoV, TGEV, PDCoV आणि PEDV चे IgG पॉझिटिव्ह दर अनुक्रमे 81.7%, 54% आणि 65.3% होते., 6%, अनुक्रमे.परिणाम दर्शविते की S-iELISA विशिष्ट, संवेदनशील आणि पुनरुत्पादक आहे आणि डुक्कर उद्योगात SADS-CoV संसर्ग शोधण्यासाठी वापरला जाऊ शकतो.हा लेख कॉपीराइटद्वारे संरक्षित आहे.सर्व हक्क राखीव.


पोस्ट वेळ: जून-22-2021